在日常細(xì)胞實驗中，我們經(jīng)常需要計算細(xì)胞濃度，以進(jìn)一步確定接種濃度或細(xì)胞數(shù)量。盡管自動細(xì)胞計數(shù)儀提供了快速性，但對于某些細(xì)胞，尤其是那些處于復(fù)雜狀態(tài)的細(xì)胞，有研究表明其分析性能并不一致[1]（對于細(xì)胞形態(tài)的識別，所采用的是不一樣的方法）。
在臨床實踐中，因血細(xì)胞自動計數(shù)儀通常無法精準(zhǔn)地識別細(xì)胞形態(tài)，所以需使用經(jīng)典的血細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行儀器校準(zhǔn)。利用顯微鏡手動進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)，這種方法已經(jīng)被廣泛認(rèn)可[2]。
血細(xì)胞計數(shù)板規(guī)格及計數(shù)原理
血細(xì)胞計數(shù)板是一種經(jīng)典的細(xì)胞計數(shù)工具，具有上下兩個計數(shù)池。
在其上方覆蓋蓋玻片，形成深度為0.10mm的計數(shù)池。每個計數(shù)池分為9個大格，每個大格的規(guī)格為1.00mm×1.00mm。因視野所限，不易操作，容易造成較大誤差，所以一般采用定點(diǎn)（計數(shù)室4個角的大方格）取樣計數(shù)。（直徑較小的細(xì)胞如紅細(xì)胞，采用中間一個大方格內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)5個區(qū)域采集計數(shù)）
細(xì)胞濃度=（四個大方格的細(xì)胞數(shù)之和）/4×稀釋倍數(shù)×104個Cell/mL
博大博聚細(xì)胞計數(shù)儀的計數(shù)之道
博大博聚細(xì)胞計數(shù)儀，沿用經(jīng)典血細(xì)胞計數(shù)板的計數(shù)原理進(jìn)行研制（JJG 552-1988 血細(xì)胞計數(shù)板試行檢定規(guī)程），并可搭載一次性細(xì)胞計數(shù)片，其細(xì)胞計數(shù)片與標(biāo)準(zhǔn)血細(xì)胞計數(shù)板的計數(shù)池高度相同。
①在使用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)時，儀器相當(dāng)于一個自帶電腦的自動化顯微成像系統(tǒng)，屏幕能夠提供細(xì)胞高清圖像的實時預(yù)覽，精密的三軸聯(lián)動控制系統(tǒng)，實現(xiàn)目標(biāo)視野的精準(zhǔn)走位，實時自動調(diào)焦，保證圖片的清晰度，并通過算法自動進(jìn)行識別與計數(shù)。 
②在使用一次性細(xì)胞計數(shù)片時，儀器屏幕會顯示虛擬刻線，刻線對應(yīng)的實際大小經(jīng)“仿細(xì)胞校準(zhǔn)板(發(fā)明專利號：ZL 2020 21855359.4)”嚴(yán)格標(biāo)定，與血細(xì)胞計數(shù)板上的刻線面積（1*1mm2）一致。
③一次性細(xì)胞計數(shù)片的空腔高度設(shè)計嚴(yán)格標(biāo)定為0.1mm，計數(shù)體積（0.1mm3）與血細(xì)胞計數(shù)板一致。
④在兩種耗材上，博大博聚細(xì)胞計數(shù)儀都采用標(biāo)準(zhǔn)的濃度計算公式，細(xì)胞濃度=（四個大方格的細(xì)胞數(shù)之和）/4×稀釋倍數(shù)×104個Cell/mL。這使得博大博聚計數(shù)儀能夠?qū)崿F(xiàn)計數(shù)結(jié)果人工核對。
博大博聚的細(xì)胞計數(shù)新范式
博大博聚細(xì)胞計數(shù)儀支持非染色（發(fā)明專利號ZL 2013 1 0101403.0）、臺盼藍(lán)染色和熒光染色等多種計數(shù)模式。儀器預(yù)設(shè)多種細(xì)胞樣本類型，對于更復(fù)雜的細(xì)胞樣本，可通過自定義輔助判讀，以尋找最適合不具代表性樣本的識別參數(shù)并可無限新增。
無論是秉持傳統(tǒng)方法還是融合創(chuàng)新思路，博大博聚計數(shù)儀都旨在為細(xì)胞計數(shù)和分析提供更全面的解決方案。
參考文獻(xiàn)：
[1] .Borzova E. The Absolute Basophil Count. Methods Mol Biol. 2020;2163:109-124.
[2] Zhang M, Gu L, Zheng P, et al. Improvement of cell counting method for Neubauer counting chamber. J Clin Lab Anal. 2020;34:e23024.
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